铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基,也不只是这一种,其它的WV、winte等都可以用,但是一般多用MS培养基,也可以用1/2MS培养基,大量元素减半,其它元素不变。
除此之外,还有加一些生长素(如IAA、IBA、NAA等),细胞分裂素(如6-BA等)。但是不同的培养时期也不同的激素配合。如诱导愈伤组织时,要两种激素的配合。增殖传代时也要两种激素的配合,但生长素为主;分化时以分裂素为主,壮苗和生根以生长素不主。一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。
此外,还有的加了什么香蕉素,椰乳等。
⑵ 石斛组织培养主要流程有哪几步
选择生长健壮的3~6厘米长的新芽作外植体。用消了毒的利刀将新芽从母体切下,经自来水冲洗30分钟后,剥去最外面一层叶鞘,在75%的酒精中迅速蘸一下,立即放入15%次氯酸钠溶液中浸泡15分钟,或放入0.1%的升汞溶液中8~10分钟,并不时用手轻摇。取出后再剥去多余的组织,再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5~10分钟,取出后用无菌水冲洗数次,然后在无菌条件下剥去叶苞片,以顶芽或侧芽作为外植体接种于试管中。
将顶芽接种于KC加1毫克/升NAA的固体培养基或KC液体培养基中,而将侧芽接种于KC固体培养基中培养,控制室温26℃、光照2000勒克斯、每天光照16~24小时。液体培养基每两周要更换1次。所产生的原球茎繁殖很快,达到一定数量时应及时转入VW+(15%~50%)椰乳+(10%~20%)香蕉汁+(10%~20%)马铃薯提取液,或MS+(10%~20%)香蕉浆,或KC+(10%~20%)香蕉汁的分化培养基上,于室温20~25℃、光照2000勒克斯、日照明16~24小时的条件下促进原球茎萌发成苗。对那些只长芽、不长根的个体,可将其转入生根培养基中培养,并在生根培养基中添加少量植物生长素,如0.1毫克/升NAA等。
⑶ 铁皮石斛培养基加活性炭好不好
1:一般情况下分化培养基不加活性炭,2:另一般情况下生根培养基可加活性炭,3:加不加活性炭一般地说是外植体有褐化的情况下才加活性炭,因为活性炭有减少褐化的作用,实际上组培是根据植物的不同情况的发生采取不同的处理方法.不能一概而论
⑷ 石斛的种植需要什么土质
石斛的种植需要排水性好、透气的沙土类土质。
石斛养殖方法:
需用泥炭苔藓、蕨根、树皮块和木炭等轻型、排水好、透气的基质。同时,盆底多垫瓦片或碎砖屑,以利于根系发育。栽培场所必须光照充足,对石斛生长、开花更加有利。春、夏季生长期,应充分浇水,使假球茎生长加快。9月以后逐渐减少浇水,使假球茎逐趋成熟,能促进开花。生长期每旬施肥1次,秋季施肥减少,到假球茎成熟期和冬季休眠期,则完全停止施肥。栽培2~3年以上的石斛,植株拥挤,根系满盆,盆栽材料已腐烂,应及时更换。无论常绿类或是落叶类石斛,均在花后换盆。换盆时要少伤根部,否则遇低温叶片会黄化脱落。
繁殖方法:
常用分株、扦插和组培繁殖。
①分株繁殖
春季结合换盆进行。将生长密集的母株,从盆内托出,少伤根叶,把兰苗轻轻掰开,选用3~4株栽15厘米盆,有利于成型和开花。
②扦插繁殖
选择未开花而生长充实的假鳞茎、从根际剪下,再切成每2~3节一段,直接插入泥炭苔藓中或用水苔包扎插条基部,保持湿润,室温在18~22℃,插后30~40天可生根。待根长3~5厘米盆栽。
③组培繁殖
常以茎尖、叶尖为外植体,在附加2,4-D0.15~0.5毫克/升、6-苄氨基腺嘌呤0.5毫克/升的MS培养基上,其分化率可达1:10左右。分化的幼芽转至含有活性炭。椰乳的MS培养基中(附加2,4--D和6-苄氨基腺嘌呤各0.1毫克/升),即能正常生长,形成无根幼苗,将幼苗转入含有吲哚丁酸0.2~0
.4毫克/升的MS培养基中,能够诱导生根,形成具有根、茎、叶的完整小植株。
⑸ 怎样栽培石斛
一、栽培设施的选择
栽培温室的建立一般要满足以下条件:棚的大小要根据种植规模的大小合理设计,温室一般长30m、宽6 m(或者8m),肩高1.8 m,总高4 m左右;种植苗床之间要预留宽l m左右的道路,方便管理。温室构建可选择钢构骨架,耐用,但一次性投入成本较高;也可选择水泥柱搭建,一次性投入成本较低,但寿命短,多年后总成本不比前者低。棚顶覆盖塑料无滴薄膜和遮荫度为70%的遮荫网,大栅四周和人口装上防虫网。育苗大棚要通水、通电、通路。且最好在棚内安装自动或手动控制的喷雾系统(喷雾、喷肥、喷药)。
二、苗床的准备
棚内搭建高架种植苗床,使其能够轻松控制水分,并透气。从而为组培苗的生长提供有利条件。可用角钢、木条等材料作为苗床的框架,苗床长度跟温室一样,宽1.2 m.架空高度40 Cm左右。床与床之间配有通道,以便栽培操作。若为了充分利用大棚空间,栽培床也可采用手摇活动式苗床,这样留一个通道,既可增加栽培面积,也可以满足操作的要求。栽培床底部一般采用钢丝网铺设,为了使基质不从空隙间漏出,在钢丝网上铺设一层40目的防虫网。然后,将准备好的基质倒于栽培床上,厚度为7-15cm。
三、基质的准备
基质的选择对铁皮石斛移栽的成活率、生长、繁殖和产量影响很大,因此移栽前基质的选择至关重要。可用于铁皮石斛移栽的基质多种多样。不同的研究人员得到的最佳基质种类也有所不同。袁正仿等分别用河沙粗麻石、碎砖石、珍珠岩(100%)、珍珠岩+椰糠(1:1),椰糠(100%)、泥炭土(100%)栽种铁皮石斛组培苗,结果发现,以泥炭土的效果最好,椰糠和珍珠岩+椰糠次之,其他效果较差。付开聪等认为,在几种基质中,不论是铁皮石斛的成活率、产量、粗状程度还是高度,均以木块+苔藓的组合的效果最好,生长优劣情况表现为:木块+苔藓>木块+锯末>木块+腐质土>锯末+河沙>锯末+腐质土。白美发等将铁皮石斛无菌试管苗(苗高5 cm)分别移栽石灰岩碎石滤水层5 cm+腐叶土8 cm+活苔藓2 cm、石灰岩碎石滤水层5 cm+碎苔藓8 cm+活苔藓2 cm、石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末8 cm+活苔藓2 cm等栽培基质中,结果发现以石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末8 cm+活苔藓2 cm为基质时铁皮石斛长势最好、产量最高。邓君浪采用2 cm大小的木块与苔藓按4:1的比例混合使用,经过高温消毒灭菌,在使用前用清水浸泡24小时,使其充分吸水,取得了较好的结果。以上几种基质,各地栽培人员根据不同的实际进行选择。
四、定植
据研究,组培苗根长在0.5-1.0cm时是移植的最佳时期。栽培前,将铁皮石斛组培苗放在室内炼苗20~25天后,用清水洗净组培苗根上的培养基,用0.1%的百菌清液消毒,以防组培苗根腐烂。栽培时,按15 cm×20 cm的株行距种植,种植时使根系自然舒展,将基质覆盖住根为宜,轻轻提苗,使苗根系能与基质充分接触,浇足定根水。铁皮石斛为丛生植物,多株种植比单株种植长势更好,以3株1丛种植更适宜。栽培时间以3~6月为宜,其间栽培组培苗成活率较高,可达95%以上,且生长健壮。
移栽时间气温过低或过高时均不宜移栽。在铁皮石斛主产地,一般来说,除最冷的1—2月和最热的7。8月外均可移栽,但一般选择4—5月。云南普洱地区铁皮石斛最佳栽培季节顺序依次为:3月中旬至6月中旬>9月上旬至11月下旬>6月下旬至l0月下旬>12月上旬至次年3月上旬。
移栽方法移栽时可在基质上挖深2—3 cm的小洞。轻轻将炼苗、出瓶洗净后的组培苗根部放人小洞.注意不要弄断石斛的肉质根,然后用基质盖好。付开聪等研究发现,在最佳生长季节移栽.铁皮石斛试管苗的大小与成活率关系不明显,而产量与试管苗长粗关系极为明显;他进一步分析认为.苗小与体内积存的有机物和能量都较少有关,小苗适应外界的能力和抵抗力都很差,生长较为缓慢。所以应将裸根苗、少根苗和污染苗与正常苗分开栽培,以便管理。
五、温室条件管理
(1)光照 铁皮石斛为耐蒴性较强的附生植物,在上午10时前有直射光为佳,其余时间需有20%~30%的散射光。在温室大棚一般采用75%的活动遮荫网。夏季适当增加遮光度,避免因光线过强而使叶面变黄脱落,冬季应适当增加光照强度,避免因光照不足而造成叶片生长柔弱。铁皮石斛生长的最适光照强度为5 000—10 000 lux。
(2)温、湿度 大棚内温度白天保持在25~30℃,夜晚15—20℃,低温不要低于8℃,高温不要高于35℃。湿度控制在60%~80%,若夏天高温低湿,可采取遮荫及微喷等措施进行降温加湿,但在保温的同时要注意通风,特别是夏天高温天气,更要注意空气流通,防止病虫害的发生;冬季气温低时,可通过加温控制其在10℃左右即可。移栽后1周内空气湿度宜保持在90%左右,1周后空气湿度可保持在70%~80%。
(3)水分 在刚定植完的1个星期内,保持基质处于湿润状态,但不积水。喷水仅用于增加空气湿度,防止叶面水分过度蒸腾而引起萎蔫。在新根萌动后,以间干间湿的原则进行浇水,一次浇足后,待基质表层发白后再浇,不能浇半吊水。不同季节浇水量也不同,夏天气温高、蒸发量大,基本上需要天天浇水;冬天温度低、水分不易散失,因而需根据基质含水量而定,栽培基质若偏干可补充一些水分。
(4)肥料 铁皮石斛气生根的营养主要靠根系的兰菌固定空气中的游离氮,但是施加适当的肥料能促进茎部增大,叶片肥壮。在新根萌动后即可开始喷施液体肥,如磷酸二氢钾液,或磷酸二氢钾加尿素液等,浓度均为0.1%左右,一般10天左右喷施1次。1~2个月后,待移栽苗已逐渐适应新的环境,新根已长出lO cm左右时,可以施加缓效颗粒肥,帮助其茁壮成长。
朱艳等认为,组培苗移植15 d后施放1/2倍营养液为最好。白美发等研究了铁皮石斛施用营养液(主要由硝酸钾、硫酸铵、硫酸镁、硫酸铁和磷酸二氢钾等组成.浓度为0.2%)对铁皮石斛产量的影响,结果表明.浇灌适当浓度的营养液可较大幅度地提高铁皮石斛的产量。铁皮石斛常用的肥料为叶面肥,白美发认为喷施叶面肥(N:P205:K20=25:13:13,其N、P、K总含量为51%,微量元素B、Fe、Zn、Cu、Mn、Mo总含量为l%)可促进铁皮石斛茎叶伸长生长,茎节、直径加长加粗,平均单株鲜重明显高于对照。
(5) 植物生长调节剂 付开聪等研究认为,施用外源生长素(如GA<赤霉素>、6-BA)对促进产量效果明显;滕建北等研究表明。激素处理能增强活性氧清除剂的活性,降低膜脂过氧化作用产生的MDA,有助于提高铁皮石斛的抗逆性。莫昭展等认为,在低浓度条件下,随着ABA(脱落酸)浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当ABA浓度为0.5mg/L时增殖最大。
⑹ 铁皮石斛培养基水分问题
一般的培养基影响不大,其实可以上下波动很大的,关键是你自己定好一个标准,那样可以重复,比如说可以都扣除,可以都不扣除。
⑺ 石斛培养基可以用自来水吗
不可以,石斛培养所用的为MS培养基,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要。而自来水中含有大量的氯离子以及金属离子,这些容易破坏本来离子比较平衡的培养基,而且这些在植物细胞培养过程中,是很敏感的刺激源,容易使得植物细胞受伤或者坏死。
⑻ 石斛怎么种植
一、选地整地
根据其生长习性,石斛栽培地宜选半阴半阳的环境,空气湿度在80%以上,冬季气温在0℃以上地区。人工可控环境也可,树种应以黄桷树、梨树、樟树等且应树皮厚有纵沟、含水多、枝叶茂、树干粗大的活树,石块地也应在阴凉、湿润地区,石块上应有苔藓生长及表面有少量腐殖质。
二、繁殖方法
石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类,目前生产上主要采用无性繁殖方法。
1、有性繁殖即种子繁殖。石斛种子极小,每个蒴果约有20000粒,呈黄色粉末状,通常不发芽,只在养分充足、湿度适宜、光照适中的条件下才能萌发生长,一般需在组培室进行培养。不过,尽管石斛繁殖系数极高,但其有性繁殖的成功率极低。
2、无性繁殖
(1)分株繁殖:在春季或秋季进行,以3月底或4月初石斛发芽前为好。选择长势良好、无病虫害、根系发达、萌芽多的1~2年生植株作为种株,将其连根拔起,除去枯枝和断技,剪掉过长的须根,老根保留3厘米左右,按茎数的多少分成若干丛,每丛须有茎4~5枝,即可作为种茎。
(2)扦插繁殖:在春季或夏季进行,以5~6月为好。选取三年生生长健壮的植株,取其饱满圆润的茎段,每段保留4~5个节,长约15~25厘米,插于蛭石或河砂中,深度以茎不倒为度,待其茎上腋芽萌发,长出白色气生根,即可移栽。一般在选材时,多以上部茎段为主,因其具顶端优势,成活率高,萌芽数多,生长发育快。
(3)高芽繁殖:多在春季或夏季进行,以夏季为主。三年生以上的石斛植株,每年茎上都要萌发腋芽,也叫高芽,并长出气生根,成为小苗,当其长到5~7厘米时,即可将其割下进行移栽。
三、田间管理
1、浇水:石斛栽植后期空气湿度过小要经常浇水保湿,可用喷雾器以喷雾的形式浇水。
2、追肥:石斛生长地贫瘠应注意追肥,第一次在清明前后,以氮肥混合猪牛粪及河泥为主。第二次在立冬前后用花生鼓、菜籽饼、过磷酸钙等加入河泥调匀糊在根部,此外尚可根外追肥。
3、调整郁闭度:石斛生长地的都闭度在60%左右,因此要经常对附生树进行整枝修剪,以免过于荫蔽或郁闭度不够。
4、整枝:每年春天前发新整时,结合采收老茎将丛内的枯茎剪除,并除去病茎、弱茎以及病者根,栽种6~8年后视丛蔸生长情况翻蔸重新分枝繁殖。
四、病虫害防治
1、石斛黑斑病:为害叶片使叶片枯萎,3~5月发生。防治方法:可用50%的多菌灵1000倍液喷雾1~2次。
2、石斛炭疽病:为害叶片及茎枝,受害叶片出现褐色或黑色病斑, 1~5月均有发生。防治方法:用50%多菌灵1000倍液或50%甲基托布津1000倍液喷雾2~3次。
3、石斛菲盾蚧:寄生于植株叶片边缘或背面,吸食汁液,5月下旬为孵化盛期。防治方法:可用40%乐果乳剂1000倍液喷雾杀灭或集中有盾壳老枝集中烧毁。
五、采收加工
1、采收:每年春末萌芽前采收,采收时剪下三年生以上的茎枝,留下嫩茎让其继续生长。
2、加工:因品种和商品药材不同,有不同加工方法,以下介绍两种方法:
(1)将采回的茎株洗尽泥沙,去掉叶片及须根,分出单茎株,放入85℃热水烫1~2分钟,捞起,摊在竹席或水泥场上暴晒,晒至5成干时,用手搓去鞘膜质,再摊晒,并注意常翻动,至足干即可。
(2)也可将洗尽的石斛放入沸水中浸烫5分钟,捞出晾干,置竹席上暴晒,每天翻动2~3次,晒至身软时,边晒边搓,反复多次至去净残存叶鞘,然后晒至足干即可。
⑼ 竹叶石斛盆栽应该用什么基质
石斛这东西是附生植物,最好是绑在蛇木桩上养,用盆的话就用树皮而且根要平摊着种上面铺上一层树皮,厚度以能固定住植株就好不可过后,你这情况是水苔的原因,水苔这东西超级吸水难干不透气只适合种蝴蝶兰,种其他兰科植物很容易烂根。
盆栽石斛养殖方法:
需用泥炭苔藓、蕨根、树皮块和木炭等轻型、排水好、透气的基质。同时,盆底多垫瓦片或碎砖屑,以利于根系发育。栽培场所必须光照充足,对石斛生长、开花更加有利。春、夏季生长期,应充分浇水,使假球茎生长加快。
9月以后逐渐减少浇水,使假球茎逐趋成熟,能促进开花。生长期每旬施肥1次,秋季施肥减少,到假球茎成熟期和冬季休眠期,则完全停止施肥。
栽培2~3年以上的石斛,植株拥挤,根系满盆,盆栽材料已腐烂,应及时更换。无论常绿类或是落叶类石斛,均在花后换盆。换盆时要少伤根部,否则遇低温叶片会黄化脱落。
⑽ 石斛组培分化培养基与增殖培养基有什么区别为什么接种在增殖培养基中的原球茎长不出苗来
要让原球茎出苗 要接到分化培养基中 加NAA、马铃薯、1/2Ms