石斛组织培养

① 石斛如何利用离体组织培养

金钗石斛可采用下述方法组培快繁试管苗。
将金钗石斛的嫩茎经常规消毒后，切成0。5～1cm段作外植体，采用MS或B5作为基本培养基，并分别附加植物激素如NAA（0。05～1、5mg/L）、IAA（0。2～1、0mg/L）、6-BA（1、0～5、0mg/L）等不同激素组合的多种培养基，培养基pH5、6～6、0，在25～28℃，每天光照9～10h，光照强度1800～1900lx条件下进行组织培养。19d后，茎叶处出现小芽点，约1个月后，小芽伸长，尖端分叉，2个月后，小芽长成高约2、0～2、7cm，具4～8个叶片的试管苗。并发现，在培养基不同配方组合中，MS比B5基本培养基对生长速度具有明显优势。

② 石斛怎样繁殖才能成功

在南方种植石斛，应选海拔300～700米的低山区，河流山谷的西北或东北坡向，较阴湿的地方。如以树木为附生者，应选树干粗、树冠密、树皮厚多纵沟纹、含水量多、常有苔藓植物生长的阔叶树，如黄角树、油桐、青杠、槲栎、乌桕和银杏等，尤以黄角树、青杠树为佳；如以岩石为附生者，应选阴湿、有苔藓植物生长的岩石或石壁，以有多处凹陷和缝隙者为佳。不长苔藓的可于头年在树干或岩石上先培养一些苔藓和石苇等。少量栽培可采用盆栽，用透气性好的泥盆或多孔洞的小木箱，内装碎石、草炭、腐殖质土等作基质，碎石放在下层、草炭、腐殖质土混合放在碎石上，每盆可栽1株。

石斛主要采用分株繁殖，也可用扦插和腋芽繁殖，近年来也有采用组织培养法进行快速繁殖，但移栽的技术难度较大，经验还不足。

（1）分株繁殖 春秋两季都可进行，以3月下旬至4月上旬发芽前栽种为好，选生长健壮、根系发达、萌蘖多、无病虫害的1、2年生植株作种，连根挖出，视茎数多少分为若干丛，剪去枯茎、断枝和过长的须根，每丛应留有健壮茎2～5支。以树木为附生者，将树皮按30厘米株距砍成鱼鳞口，将石斛种株的根放在鱼鳞口内卡紧或用竹蔑捆上，使根与树皮紧密结合，然后糊上用牛粪、阴沟泥等混合而成的污泥浆，在栽培的树上把过密的枝叶修剪去一部分，使透点光；若在石上栽种，则选生有苔藓的大石包，种在凹处或石缝里，如石上光秃无凹缝，可人造凹缝后，将石斛种株放在凹缝处，用小石块将石斛根部压着，周围敷上泥粪，牢固即可。

（2）扦插繁殖 插床基质可用腐殖质土或蛭石，并搭好荫棚，扦插时将石斛分成单株，每株1茎，按行株距10厘米左右扦插于基质中，深度以茎不倒为度。插后要常浇水，保持湿润，当腋芽萌发并长出白色气生根后，将单株横置畦床上，用小石块压着，上盖细腐殖质土约2厘米厚，待幼芽3～5厘米高时，分割幼芽移栽于树干或石头上。也可在采收时将三年生石斛茎剪为两段，下段加工为商品，上段作为繁殖材料，将上段横置于阴湿的平石板上，摆前于石板上敷一层薄薄的泥粪，摆后用小石头将下部压着进行育苗，当腋芽和气生根长出形成幼苗时即可移栽。

（3）腋芽繁殖 在3年生石斛茎的上端，常会萌发腋芽，并长出气生根，待腋芽长至5～7厘米高时，即可将其从母茎上剪下，进行移栽。

③ 石斛怎么种植

一、选地整地

根据其生长习性，石斛栽培地宜选半阴半阳的环境，空气湿度在80%以上，冬季气温在0℃以上地区。人工可控环境也可，树种应以黄桷树、梨树、樟树等且应树皮厚有纵沟、含水多、枝叶茂、树干粗大的活树，石块地也应在阴凉、湿润地区，石块上应有苔藓生长及表面有少量腐殖质。

二、繁殖方法

石斛的繁殖方法分为有性繁殖和无性繁殖两大类，目前生产上主要采用无性繁殖方法。

1、有性繁殖即种子繁殖。石斛种子极小，每个蒴果约有20000粒，呈黄色粉末状，通常不发芽，只在养分充足、湿度适宜、光照适中的条件下才能萌发生长，一般需在组培室进行培养。不过，尽管石斛繁殖系数极高，但其有性繁殖的成功率极低。

2、无性繁殖

（1）分株繁殖：在春季或秋季进行，以3月底或4月初石斛发芽前为好。选择长势良好、无病虫害、根系发达、萌芽多的1～2年生植株作为种株，将其连根拔起，除去枯枝和断技，剪掉过长的须根，老根保留3厘米左右，按茎数的多少分成若干丛，每丛须有茎4～5枝，即可作为种茎。

（2）扦插繁殖：在春季或夏季进行，以5～6月为好。选取三年生生长健壮的植株，取其饱满圆润的茎段，每段保留4～5个节，长约15～25厘米，插于蛭石或河砂中，深度以茎不倒为度，待其茎上腋芽萌发，长出白色气生根，即可移栽。一般在选材时，多以上部茎段为主，因其具顶端优势，成活率高，萌芽数多，生长发育快。

（3）高芽繁殖：多在春季或夏季进行，以夏季为主。三年生以上的石斛植株，每年茎上都要萌发腋芽，也叫高芽，并长出气生根，成为小苗，当其长到5～7厘米时，即可将其割下进行移栽。

三、田间管理

1、浇水：石斛栽植后期空气湿度过小要经常浇水保湿，可用喷雾器以喷雾的形式浇水。

2、追肥：石斛生长地贫瘠应注意追肥，第一次在清明前后，以氮肥混合猪牛粪及河泥为主。第二次在立冬前后用花生鼓、菜籽饼、过磷酸钙等加入河泥调匀糊在根部，此外尚可根外追肥。

3、调整郁闭度：石斛生长地的都闭度在60%左右，因此要经常对附生树进行整枝修剪，以免过于荫蔽或郁闭度不够。

4、整枝：每年春天前发新整时，结合采收老茎将丛内的枯茎剪除，并除去病茎、弱茎以及病者根，栽种6~8年后视丛蔸生长情况翻蔸重新分枝繁殖。

四、病虫害防治

1、石斛黑斑病：为害叶片使叶片枯萎，3~5月发生。防治方法：可用50%的多菌灵1000倍液喷雾1~2次。

2、石斛炭疽病：为害叶片及茎枝，受害叶片出现褐色或黑色病斑， 1~5月均有发生。防治方法：用50%多菌灵1000倍液或50%甲基托布津1000倍液喷雾2~3次。

3、石斛菲盾蚧：寄生于植株叶片边缘或背面，吸食汁液，5月下旬为孵化盛期。防治方法：可用40%乐果乳剂1000倍液喷雾杀灭或集中有盾壳老枝集中烧毁。

五、采收加工

1、采收：每年春末萌芽前采收，采收时剪下三年生以上的茎枝，留下嫩茎让其继续生长。

2、加工：因品种和商品药材不同，有不同加工方法，以下介绍两种方法：

（1）将采回的茎株洗尽泥沙，去掉叶片及须根，分出单茎株，放入85℃热水烫1~2分钟，捞起，摊在竹席或水泥场上暴晒，晒至5成干时，用手搓去鞘膜质，再摊晒，并注意常翻动，至足干即可。

（2）也可将洗尽的石斛放入沸水中浸烫5分钟，捞出晾干，置竹席上暴晒，每天翻动2~3次，晒至身软时，边晒边搓，反复多次至去净残存叶鞘，然后晒至足干即可。

④ 铁皮石斛组培苗要用种子吗

铁皮石斛组培苗有两种生产方式，其中一种要用种子。

铁皮石斛组培技术一种是直接采用铁皮石斛茎段培育，不同外植体对愈伤组织的诱导率有很大差异，以茎段诱导的愈伤组织出愈率最高，达到了83.3%。获得大量的铁皮石斛愈伤组织和幼苗。另一种则是使用铁皮石斛种子，种子萌发后形成原球茎，利用培养基对铁皮石斛诱导和增殖，得到大量铁皮石斛原球茎，然后培育出铁皮石斛幼苗。用种子生产的组培苗质量明显更高，有利于铁皮石斛组培苗的生产。

研究人员从野生铁皮石斛中分离获得内生真菌25 种，其中5 种真菌可促进铁皮石斛种子萌发，7 种真菌可与铁皮石斛幼苗形成共生关系，3 种真菌对幼苗生长有促进作用。因此分离和筛选促进铁皮石斛生长发育的适宜菌根真菌，是提高试管苗移栽成活率，解决生产的关键问题之一。

铁皮石斛组培苗和野生品多糖含量基本相同。对植物形态及茎、叶等组织构造的对比研究和总多糖含量比较表明，铁皮石斛组培品和野生品植物形态相似，组织结构基本相同，主要成分总多糖含量无显著性差异，二者药材品质相近。因此铁皮石斛试管苗经大田栽培后可替代野生药材，通过组织培养培育大量试管苗，发展铁皮石斛人工栽培是解决铁皮石斛资源紧缺问题的有效途径。

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⑥ 石斛组织培养主要流程有哪几步

选择生长健壮的3～6厘米长的新芽作外植体。用消了毒的利刀将新芽从母体切下，经自来水冲洗30分钟后，剥去最外面一层叶鞘，在75%的酒精中迅速蘸一下，立即放入15%次氯酸钠溶液中浸泡15分钟，或放入0.1%的升汞溶液中8～10分钟，并不时用手轻摇。取出后再剥去多余的组织，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5～10分钟，取出后用无菌水冲洗数次，然后在无菌条件下剥去叶苞片，以顶芽或侧芽作为外植体接种于试管中。

将顶芽接种于KC加1毫克/升NAA的固体培养基或KC液体培养基中，而将侧芽接种于KC固体培养基中培养，控制室温26℃、光照2000勒克斯、每天光照16～24小时。液体培养基每两周要更换1次。所产生的原球茎繁殖很快，达到一定数量时应及时转入VW+（15%～50%）椰乳+（10%～20%）香蕉汁+（10%～20%）马铃薯提取液，或MS+（10%～20%）香蕉浆，或KC+（10%～20%）香蕉汁的分化培养基上，于室温20～25℃、光照2000勒克斯、日照明16～24小时的条件下促进原球茎萌发成苗。对那些只长芽、不长根的个体，可将其转入生根培养基中培养，并在生根培养基中添加少量植物生长素，如0.1毫克/升NAA等。

⑦ 石斛兰怎么进行组织培养繁殖

主要用茎尖培养选取健壮充实的新芽，在无菌条件下剥取顶芽为外植体，进行液体振荡培养，当外植体产生的原球茎有一定数量后即可转移到固体培养基上培养

⑧ 石斛组织培养是什么

你好，石斛属于花卉的一种。
组织培养就是利用生物技术来培养石斛细胞
使之实现快速的繁殖
对身体没有什么损害
属于重复性工作

⑨ 铁皮石斛组培中是否要用到细胞分裂素，为什么

组织培养要用到：细胞分裂素和生长素

⑩ 铁皮石斛组织培养的培养基成分有哪些

铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。

除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。但是不同的培养时期也不同的激素配合。如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。

此外，还有的加了什么香蕉素，椰乳等。