石斛多糖醇沉後離心多久

❶ 醇沉多糖的問題——急！！！

鹽濃度主要影響蛋白質的沉澱，對多糖的沉澱影響不大。
我覺得是你的醇濃度不夠，所以沒有形成多糖沉澱。用三倍95％的乙醇，這樣形成的溶液純度只有71％，有點低了。最好用無水乙醇去混合。而且要注意原始溶液濃度不能太低。

❷ 怎麼提取植物的多糖

1.1溶劑提取法
溶劑提取法[2]是從植物中提取多糖的常用方法，溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑，一般應遵循相似相溶的原則，即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑，極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物，應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中，水是典型的強極性溶劑，對植物組織的穿透力
強，提取效率高，在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖，被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時，可以用熱水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法，該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物；或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質，用高濃度乙醇沉澱提純多糖；但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同，它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離；還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離；其中，以乙醇沉澱最為普遍[3]。劉青梅[4]等在紫菜粗多糖提取方式研
究中，熱水提取控制條件為：溫度為20~100℃，水與紫
菜的液固質量比為50:1，提取時間30~180min，經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗[5]得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素：浸提溫度為煮沸(102℃)，pH為3.0，
浸提時間為3h，液固質量比為40:1。李戰[6]對三種紫球
藻的提取工藝研究表明，三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%，乙醇用量為3倍體積，醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1，樣液與Sevag試劑的比例1:2，作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%，乙醇用量為2倍體積，醇沉時間為1h，氯仿與正
丁醇的比例3:1，樣液與Sevag試劑的比例1:2，作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積，醇沉時間為0.5h，氯仿與
正丁醇的比例4:1，樣液與Sevag試劑的比例2:1，作用
時間為45min。
1.2酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取，才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性，因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢，而
且即使有優勢，在操作上還應嚴格控制酸鹼度[3]。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時，可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外，稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析，濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇[7]等對海篙
子多糖的提取方法研究發現，從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為：100g海
篙子乾粉，加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾，重復操作三遍，合並濾液；濾液減壓濃
縮至總體積的1/5，再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%，沉澱，離心除去沉澱中的褐藻酸，繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全，離心，沉澱乾燥得海篙子粗多糖，多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元[8]等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提，以稀酸提取茜草多糖，產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%，靜置，2500rpm
離心，收集棕色沉澱物，95%ETOH洗滌3次，用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色，真空抽濾，濾液4℃過
夜，棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內，逆水
法透析3d，冷凍乾燥，得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko[9]發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法，而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為：將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液，熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離，取粘稠的固狀物，加入鹼水，在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取，鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0，靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術，在多糖的提取過程中，使用酶可降低提取
條件，在比較溫和的條件中分解植物組織，加速多糖的
釋放或提取。此外，使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物，常用的酶有蛋白酶，纖維素酶，果
膠酶等。孟江[10]研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響，根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取，後
木瓜蛋白酶提取)，接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和，多糖得率及含量較高，且蛋白含量較低，實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝：先用胰蛋白酶3%，40倍體積在pH=7.0，65℃溫
浸1.5h後，再加木瓜蛋白酶2.5%，在pH=7.0，50℃水
溫浸1h，過濾殘渣加40倍體積水，迅速升溫至80℃，
然後溫浸1.5h。
此外，植物多糖的提取方法還有超濾法，超聲波強
化法，微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新，但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時，應當根據目標多糖的特點、物理化學性質，綜合比
較，進行實驗，選取最佳方法和提取工藝。

❸ 鐵皮石斛的密度民多糖含量有關嗎

關系肯定是有的，但不一定是正比。兩根一樣粗的鐵皮石斛，不一定多糖含量也一樣。
特別不同的品種，不同產地，不同養植方法下，含糖量也會有差別。

葯材鐵皮石斛是石斛的一種，為蘭科植物鐵皮石斛（Dendrobium．candimWall. ex Lindl.）的新鮮或乾燥莖，屬被子植物門單子葉綱微子目蘭科石斛屬，又稱鐵吊蘭、鐵皮蘭和里書草。
分布地區
野生的鐵皮石斛大多分布在東亞、東南亞及澳大利亞等國家和地區，我國主要集中在廣西、雲南和貴州等省。

治療功效
鐵皮石斛性微寒，味甘、淡。具有滋陰清熱、養胃生津之功效。可用於治療具有陰虛證的急性及慢性咽喉炎、慢性支氣管炎、結核病、甲狀腺功能亢進、糖尿病、慢性肝炎、慢性萎縮性胃炎、免疫功能綜合征和癌症放化療調理等病症，並可增強中老抗病能力。

提取方法
鐵皮石斛多糖的提取方法：
鐵皮石斛全草粉末經95%乙醇和丙酮提取後，加20倍水，於90℃溫度下水浴1h，殘渣反復提取3次。過濾，合並濾液，減壓濃縮，4倍體積的95%乙醇沉澱數次，再溶解、濃縮、透析、凍干，得石斛粗多糖。稱取0.2g石斛粗多糖樣品溶於20ml雙蒸水中，置於40ml離心管中，按樣品溶液和脫蛋白試劑體積比為4：1加Sevag試劑（異戊醇：氯仿為1：4）5ml，振盪2min，常溫下3000r/min離心20min，取上清重復上述操作，直至脫蛋白完全。上清加4倍95%乙醇，收集沉澱物依次用無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，揮去溶劑，真空乾燥得粗製品，溶於熱水，濾去不溶物。濃縮，乾燥得石斛粗多糖。

❹ 多糖醇沉時間超過24小時有影響嗎

1、你可以取少量的濃縮液去做冷凍乾燥，不幹燥成固體測溶液中多糖的濃度有點麻煩，首先你得摸清楚你的濃縮液稀釋到多少倍後用硫酸苯酚法測得的吸光度在0.3~0.7之間，然後再配相應濃度的葡萄糖溶液。
2、你說的就是分步醇沉的方法，測乙醇濃度可以用酒精計，或者自己算，自己算你得先清楚你所用的乙醇的濃度，無水乙醇好算一點，95%的乙醇稍微麻煩些，但都不是問題。料液中乙醇的終濃度
C=加入乙醇前溶液體積V1*加入乙醇前溶液乙醇濃度C1+所加入的乙醇體積V2*所加入的乙醇濃度C2/V1+V2，那按這個公式就能算出你想要的東西。
3、多糖是由不同數量的單糖按不同的序列聚合起來的，分子量分布很廣，而分子量與多糖的溶解性密切相關，所以分步醇沉出來的多糖肯定會有多有少，這是很正常的現象。

❺ 常見的多糖有哪些 他們的提取方法比較

多糖的廣義分類分為： 均一性多糖和不均一性多糖。
均一性多糖：
由一種單糖分子縮合而成的多糖，叫做均一性多糖。自然界中最豐富的均一性多糖是澱粉和糖原、纖維素。它們都是由葡萄糖組成。澱粉和糖原分別是植物和動物中葡萄糖的貯存形式，纖維素是植物細胞主要的結構組分。
1、 澱粉 澱粉是植物營養物質的一種貯存形式，也是植物性食物中重要的營養成分，分為直鏈澱粉和支鏈澱粉。① 直鏈澱粉：許多α-葡萄糖以α(1-4)糖苷鍵依次相連成長而不分開的葡萄糖多聚物。典型情況下由數千個葡萄糖線基組成，分子量從150000到600000。結構：長而緊密的螺旋管形。這種緊實的結構是與其貯藏功能相適應的。遇碘顯蘭色。② 支鏈澱粉：在直鏈的基礎上每隔20-25個葡萄糖殘基就形成一個-(1-6)支鏈。不能形成螺旋管，遇碘顯紫色。澱粉酶：內切澱粉酶（α-澱粉酶）水解α-1.4鍵，外切澱粉酶（β-澱粉酶）α-1.4，脫支酶α-1.6。 2、 糖元 與支鏈澱粉類似，只是分支程度更高，每隔4個葡萄糖殘基便有一個分支。結構更緊密，更適應其貯藏功能，這是動物將其作為能量貯藏形式的一個重要原因，另一個原因是它含有大量的非原性端，可以被迅速動員水解。糖元遇碘顯紅褐色。
3、 纖維素結構 許多β-D-葡萄糖分子以β-(1-4)糖苷鍵相連而成直鏈。纖維素是植物細胞壁的主要結構成份，占植物體總重量的1/3左右，也是自然界最豐富的有機物，地球上每年約生產1011噸纖維素。經濟價值：木材、紙張、纖維、棉花、亞麻。完整的細胞壁是以纖維素為主，並粘連有半纖維素、果膠和木質素。約40條纖維素鏈相互間以氫鍵相連成纖維細絲，無數纖維細絲構成細胞壁完整的纖維骨架。降解纖維素的纖維素主要存在於微生物中，一些反芻動物可以利用其消化道內的微生物消化纖維素，產生的葡萄糖供自身和微生物共同利用。雖大多數的動物(包括人)不能消化纖維素，但是含有纖維素的食物對於健康是必需的和有益的。
4、 幾丁質(殼多糖) N-乙醯-D-葡萄糖胺以(1，4)糖苷鏈相連成的直鏈。
5、菊 糖 ：多聚果糖，存在於菊科植物根部。
6、 瓊 脂 ：多聚半乳糖，是某些海藻所含的多糖，人和微生物不能消化瓊脂。

不均一性多糖
有不同的單糖分子縮合而成的多糖，叫做不均一多糖。常見的有：透明質酸、硫酸軟骨素等。
有一些不均一性多糖由含糖胺的重復雙糖系列組成，稱為糖胺聚糖(glyeosaminoglycans，GAGs)，又稱粘多糖。(mucopoly saceharides)、氨基多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要組分，按重復雙糖單位的不同，糖胺聚糖有五類：
1、透明質酸
2、硫酸軟骨素
3、硫酸皮膚素
4、硫酸用層酸
5、肝素
6、硫酸乙醯肝素

植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法，具體步驟
一、儀器、試劑和材料

1.儀器：電子天平，超聲波清洗器，電熱恆溫水浴鍋，抽濾設備，分光光度計，容量瓶，刻度吸管等

2.試劑：

(1)葡萄糖標准液：l00 µg/mL

(2)濃硫酸

(3)蒽酮試劑：0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。

3.材料：甜高粱，甘草

二.操作步驟

1.葡萄糖標准曲線的製作

取7支大試管，按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液：

管號
1
2
3
4
5
6
7

葡萄糖標准液（mL）
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8

蒸餾水（mL）
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2

葡萄糖含量（µg）
0
10
20
30
40
60
80

在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL，迅速浸於冰水浴中冷卻，各管加完後一起浸於沸水浴中，管口加蓋，以防蒸發。自水浴沸騰起計時，准確煮沸l0 min，取出，用冰浴冷卻至室溫，在620 nm波長下以第一管為空白，迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量（µg）為橫坐標，以吸光值為縱坐標，繪出標准曲線。

2.植物樣品中可溶性糖的提取：將樣品粉碎，105 ºC烘乾至恆重，精確稱取1~5 g，置於50mL三角瓶中，加沸水25mL，加蓋，超聲提取10 min，冷卻後過濾（抽濾），殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾（抽濾），濾液收集在50mL容量瓶中，定容至刻度，得可溶性糖的提取液。

3.稀釋：吸取提取液2mL，置於另一50mL容量瓶中，以蒸餾水定容，搖勻。

4.測定：吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中，加入4.0 mL蒽酮試劑，平行三份；空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量（µg）。

三、結果處理：

C × V總 × D

樣品含糖量（%）= ————————————— × 100%

W × V測 × 106

其中：C——在標准曲線上查出的糖含量（µg），

V總——提取液總體積（mL），

V測——測定時取用體積（mL），

D——稀釋倍數，

W——樣品重量（g），

106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數

溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法，溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑，一般應遵循相似相溶的原則，即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑，極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物，應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中，水是典型的強極性溶劑，對植物組織的穿透力
強，提取效率高，在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖，被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時，可以用熱水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法，該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物；或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質，用高濃度乙醇沉澱提純多糖；但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同，它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離；還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離；其中，以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中，熱水提取控制條件為：溫度為20~100℃，水與紫
菜的液固質量比為50:1，提取時間30~180min，經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素：浸提溫度為煮沸(102℃)，pH為3.0，
浸提時間為3h，液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明，三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%，乙醇用量為3倍體積，醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1，樣液與Sevag試劑的比例1:2，作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%，乙醇用量為2倍體積，醇沉時間為1h，氯仿與正
丁醇的比例3:1，樣液與Sevag試劑的比例1:2，作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積，醇沉時間為0.5h，氯仿與
正丁醇的比例4:1，樣液與Sevag試劑的比例2:1，作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取，才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性，因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢，而
且即使有優勢，在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時，可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外，稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析，濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現，從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為：100g海
篙子乾粉，加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾，重復操作三遍，合並濾液；濾液減壓濃
縮至總體積的1/5，再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%，沉澱，離心除去沉澱中的褐藻酸，繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全，離心，沉澱乾燥得海篙子粗多糖，多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提，以稀酸提取茜草多糖，產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%，靜置，2500rpm
離心，收集棕色沉澱物，95%ETOH洗滌3次，用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色，真空抽濾，濾液4℃過
夜，棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內，逆水
法透析3d，冷凍乾燥，得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法，而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為：將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液，熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離，取粘稠的固狀物，加入鹼水，在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取，鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0，靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術，在多糖的提取過程中，使用酶可降低提取
條件，在比較溫和的條件中分解植物組織，加速多糖的
釋放或提取。此外，使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物，常用的酶有蛋白酶，纖維素酶，果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響，根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取，後
木瓜蛋白酶提取)，接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和，多糖得率及含量較高，且蛋白含量較低，實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝：先用胰蛋白酶3%，40倍體積在pH=7.0，65℃溫
浸1.5h後，再加木瓜蛋白酶2.5%，在pH=7.0，50℃水
溫浸1h，過濾殘渣加40倍體積水，迅速升溫至80℃，
然後溫浸1.5h。
此外，植物多糖的提取方法還有超濾法，超聲波強
化法，微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新，但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時，應當根據目標多糖的特點、物理化學性質，綜合比
較，進行實驗，選取最佳方法和提取工藝。

❻ 鐵皮石斛多糖的提取方法

鐵皮石斛多糖的提取方法：
鐵皮石斛全草粉末經95%乙醇和丙酮提取後，加20倍水，於90℃溫度下水浴1h，殘渣反復提取3次。過濾，合並濾液，減壓濃縮，4倍體積的95%乙醇沉澱數次，再溶解、濃縮、透析、凍干，得石斛粗多糖。稱取0.2g石斛粗多糖樣品溶於20ml雙蒸水中，置於40ml離心管中，按樣品溶液和脫蛋白試劑體積比為4：1加Sevag試劑（異戊醇：氯仿為1：4）5ml，振盪2min，常溫下3000r/min離心20min，取上清重復上述操作，直至脫蛋白完全。上清加4倍95%乙醇，收集沉澱物依次用無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌，揮去溶劑，真空乾燥得粗製品，溶於熱水，濾去不溶物。濃縮，乾燥得石斛粗多糖。

❼ 鐵皮石斛多糖制備的理論意義

1、鐵皮石斛多糖制備可以提高人體免疫調節的意義。
2、抑制腫瘤的意義。
3、抗突變的意義。以上是鐵皮石斛多糖制備的理論意義。

❽ 多糖醇沉是什麼原理

多糖是多羥基的醛或酮，可溶於水，但是在多糖水溶液中加入乙醇會破壞多糖水溶液中的氫鍵，從而降低多糖在水中的溶解度，使多糖以沉澱的形式析出。不同濃度的醇沉澱的組分不一樣，一般採取分級醇沉。醇沉的時候單糖也可以被醇沉出來，醇濃度越高單糖被沉澱出來的量也會越高。
就是利用溶解度，和鹽析原理類似。
多糖如果參用分級醇沉，會分出來不同分子量的多糖，但是這僅僅是一個粗分，醇沉很容易包裹一些小分子，導致樣品不純，需要進一步做色譜層析，一般多糖用G25，或者S400（可加壓）。

❾ 什麼是石斛多糖

石斛多糖是石斛獨有的一種活性營養物質，能有效提高機體免疫功能，對人體眼、咽、肺。胃、腸、腎等器官和血液、心血管等疾病有特殊療效，並且具有抗白內障，延緩衰老，抗突變，抗腫瘤等功效，是評判石斛優劣的一項有效指標。
目前市面上的石斛的多糖含量一般都在30%左右，不過用紅花油茶樹共生的古茶石斛可以達到六成。