採用反向高效液相色譜250 nm 紫外檢測使用梯度洗脫,6 種原單糖12苯基232甲基252吡唑啉酮衍實現良離並具良峰形單糖組定量測定進行考察,建立單糖組析數據析,並用所建立糖單糖組進行析,獲良重復性
② 高效液相色譜法怎樣計算檢出限和定量限
首先要採集一段基線，看一看波動情況，需要一段穩定的波動，看看最高點和最低點之間的高度。這個就是你的儀器噪音。
然後是將你需要測定的樣品進樣分析，當信噪比為10的時候，這個濃度就是定量限；當信噪比為3的時候，這個濃度就是檢測限。信噪比的意思就是信號/噪音。
比如說，你的噪音高度大約是0.1mV，那麼檢測限就是你的待測樣品逐級稀釋至 樣品峰高為0.3mV時樣品的濃度，定量限則是峰高為1.0mV時的樣品濃度。
你可以選擇線性最小濃度的樣品進樣，假設它的濃度是10ug/ml，進樣後主峰峰高是10mV，那麼你的定量限濃度大約是這個濃度稀釋10倍，也就是1ug/ml。而檢測限濃度則需要這個濃度再稀釋3倍，大約是0.3ug/ml
③ 高效液相色譜法測定中葯含量採用的方法有哪些
遵照下面的要求選擇合適的方法，HPLC法外標、內標兩種，檢測器一般UV即可。
含量測定分析方法驗證的可接受標准簡介
摘要：本文介紹了在對含量測定所用的分析方法進行方法學驗證時，各項指標的可接受標准，以利於判斷該分析方法的可行性。
關鍵詞：含量測定 分析方法驗證 可接收標准
在進行質量研究的過程中，一項重要的工作就是要對質量標准中所涉及到的分析方法進行方法學驗證，以保證所用的分析方法確實能夠用於在研葯品的質量控制。為規范對各種分析方法的驗證要求，我國已於2005年頒布了分析方法驗證的指導原則。該指導原則對需要驗證的分析方法及驗證的具體指標做了比較詳細的闡述。但是文中未涉及各具體指標在驗證時的可接受標准，國際上已頒布的指導原則中也未發現相關的要求。另一方面，大多數葯品研發單位在進行質量研究時，已逐步認識到分析方法驗證的必要性與重要性，大都也在按照指導原則的要求進行分析方法驗證，但驗證完後卻因沒有一個明確的可接受標准，而難以判斷該分析方法是否符合要求。本文結合國外一些大型葯品研發企業在此方面的要求，提出了在對含量測定方法進行驗證時的可接受標准，供國內的葯品研發單位在進行研究時參考。
1．准確度
該指標主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求分別配製濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。
可接受的標准為：各濃度下的平均回收率均應在98.0%-102.0%之間，9個回收率數據的相對標准差（RSD）應不大於2.0%。
2．線性
線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：
在80％至120％的濃度范圍內配製6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算相應的含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析。
可接受的標准為：回歸線的相關系數（R）不得小於0.998，Y軸截距應在100％響應值的2％以內，響應因子的相對標准差應不大於2.0%。
3．精密度
1）重復性
配製6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標准差應不大於2.0%。
2）中間精密度
配製6份相同濃度的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數據的相對標准差應不大於2.0%。
4．專屬性
可接受的標准為：空白對照應無干擾，主成分與各有關物質應能完全分離，分離度不得小於2.0。以二極體陣列檢測器進行純度分析時，主峰的純度因子應大於980。
5．檢測限
主峰與噪音峰信號的強度比應不得小於3。
6．定量限
主峰與噪音峰信號的強度比應不得小於10。另外，配製6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液主峰的保留時間的相對標准差應不大於2.0%。
7．耐用性
分別考察流動相比例變化±5％、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20％時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次。可接受的標准為：主峰的拖尾因子不得大於2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量數據（n=6）的相對標准差應不大於2.0%。
8、系統適應性
配製6份相同濃度的供試品溶液進行分析，主峰峰面積的相對標准差應不大於2.0%，主峰保留時間的相對標准差應不大於1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大於2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離，主峰的理論塔板數應符合質量標準的規定。
④ 如何建立高效液相色譜法測定含量的方法
1色譜條件的確定專屬性是色譜條件建立的關鍵通常是採用在被測物對照品(或供試品)中加入適量的雜質或輔料以驗證所選色譜條件能否將各雜質與被測物分離檢出
⑤ 高效液相色譜使用步驟
高效液相色譜儀操作步驟如下：
1)． 過濾流動相，根據需要選擇不同的濾膜.
2)． 對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鍾。
3)． 打開hplc工作站（包括計算機軟體和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統。
4)． 進入hplc控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。
5)． 有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。
6)． 調節流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。
7)． 設計走樣方法。
8)． 進樣和進樣後操作。
9)． 關機時，先關計算機，再關液相色譜。
10)． 填寫登記本，由負責人簽字。
11)． 流動相均需色譜純度，水用20m的去離子水。
12)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要讓液體過柱子。
13)． 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
14)． 壓力不能太大，最好不要超過2000 psi。
⑥ HPLC、UV、GC、TLC是什麼檢測方法
TLC:薄層色譜法.系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開後，根據比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對比，用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。
PC:紙色譜法.是一種可以測試物質的純度與分離混合物的方法，因為它可以快速的完成分析，而且對材料的限制很少，所以是一種極方便而且有用的分析方法。紙色譜法用的分離原則跟薄層色譜法一樣，物質分布在一個固定相與流動相。固定相通常是濾紙，流動相會帶著物質在上面流動，這個裝置將會根據混合物中不同物質對固定相的附著力和對流動相的溶解度而分離出來。分析顏料時，如果顏料中含有不只一種物質，不同顏色的物質會就根據溶劑和不同溶質的極性分開，這是因為不同的分子結構極有可能有不同的極性。這些不同的極性造就對溶劑的不同溶解度，使各種溶質會在溶劑擴散的不同位置沉澱在固定相上以斑點呈現，就可以根據固定相上的斑位置及大小作分析。
HPLC:高效液相色譜法.是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。
GC:氣相色譜.可分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜指流動相是氣體，固定相是固體物質的色譜分離方法。例如活性炭、硅膠等作固定相；氣液色譜指流動相是氣體，固定相是液體的色譜分離方法。例如在惰性材料硅藻土塗上一層角鯊烷，可以分離、測定純乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等雜質。
⑦ 用高效液相方法所測的數據，怎麼計算樣品的濃度，現在很急，會算的希
10.58/100/10=0.01058（mg/ml），這是對照品的濃度。
然後：
對照品濃度/782727=樣品1濃度/69037
對照品濃度/782727=樣品2濃度/748388
所以：
樣品1濃度=0.01058/782727×69037
樣品2濃度=0.01058/782727×748388
剩下的自己算了。就這么簡單的。