石斛愈伤组织诱导用什么材料

1. 植物组织培养诱导愈伤组织的方法有哪些

看诱导材料是哪类的：一般是用生长素和细胞分裂素按适宜的比例诱导.生长素一般有IAA,NAA,2,4-D等,常用浓度有1.0-7.0mg/l不等,细胞分裂素用KT,6-BA,玉米素等.一般是暗培养,25度,培养两周到一个月不等.

2. 铁皮石斛组织培养的培养基成分有哪些

铁皮石斛组织培养的培养基用到的主要基本培养基是MS培养基，也不只是这一种，其它的WV、winte等都可以用，但是一般多用MS培养基，也可以用1/2MS培养基，大量元素减半，其它元素不变。

除此之外，还有加一些生长素（如IAA、IBA、NAA等），细胞分裂素（如6-BA等）。但是不同的培养时期也不同的激素配合。如诱导愈伤组织时，要两种激素的配合。增殖传代时也要两种激素的配合，但生长素为主；分化时以分裂素为主，壮苗和生根以生长素不主。一般用量都是0.1-10mg/L这个范围里。

此外，还有的加了什么香蕉素，椰乳等。

3. 在诱导愈伤组织分化时哪些物质起作用

在植物的组织培养中，从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。启动期指细胞准备进行分裂的时期。外源植物生长激素对诱导细胞开始分裂效果很好。常用的有萘乙酸、吲哚乙酸、细胞分裂素等。通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:l来诱导植物材料愈伤组织的形成。

4. 铁皮石斛是中国特有的贵药材，有关铁皮石斛的研究已成为国内外生命科学研究的热点和前沿，近几年来对铁皮

（1）铁皮石斛有性生殖繁殖率很低，所以繁殖常用无性繁殖方式进行，如分株、扦插，也可采用植物组织培养技术进行繁殖．植物分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此利用茎尖植物组织培养获得的植株几乎无病毒．同一株铁皮石斛不同部位的细胞进行培养获得的愈伤组织的基因型不一定相同，如花粉细胞和体细胞脱分化形成的愈伤组织的基因型不同．
（2）由以上分析可知，蔗糖能为生长、分化提供能量；光能促进细胞分化．
（3）铁皮石斛是植物细胞，其作为提取DNA的实验材料时，与从鸡血细胞中提取DNA相比，实验过程中通常要增加研磨步骤，以破坏细胞壁．提取DNA的原理是：利用DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同，选择适当浓度的NaCl可使DNA溶解或析出，从而能与其他物质分离．
（4）基因表达载体一般包括启动子、终止子、复制原点、（抗虫）目的基因和标记基因．
（5）声波刺激可促进铁皮石斛多糖的合成，其中声波属于物理信息．
故答案为：
（1）植物组织培养茎尖几乎无病毒不一定相同
（2）蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化
（3）研磨利用DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同，选择适当浓度的NaCl可使DNA溶解或析出，从而能与其他物质分离．
（4）启动子、终止子
（5）物理

5. 愈伤组织诱导的原理

基本原理
已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞，这个过程称为脱分化（dedifferentiation）。来自于植物各种器宫的外植体在离体培养条件下，细胞经脱分化等一系列过程，改变了它们原有的特性而转变形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团，即愈伤组织。一般情况下，植物各器官和组织均有诱导产生愈伤组织的潜在可能性。
植物生长调节剂是诱导愈伤组织形成的极为重要的因素。生长素是用于诱导愈伤组织形成的生长物质，常用的种类有2,4-D , IAA 和NAA , 所需浓度在0.01～10mg/L 范围内；常用的细胞分裂素是激动素、玉米素和6-BA ，使用的浓度范围在0.1～10mg/L。对有些植物材料而言，生长素和细胞分裂素对保持愈伤组织的快速生长是必要的，特别是两者结合使用时，能更强烈地刺激愈伤组织的形成。来自于不同植物、同一植物的不同器官或组织，产生的愈伤组织在质地和物理性状方面是有差别的。
在一定条件下，离体的外植体可以形成愈伤组织（即一块未分化的组织），形成愈伤组织的过程也是细胞的脱分化过程。已有的实验表明，所有的多细胞植物，包括双子叶植物和单子叶植物，都有诱发愈伤组织形成的潜在可能性。一般认为诱发愈伤组织成败的关键不在于植物材料的来源，而在于培养的条件。外植体上损伤的细胞能释放一种自溶产物，对诱导细胞的分裂起着重要的作用。
但在培养基中还必须加人一些生长调节物质，才能使已经分化后静止的细胞恢复分裂、脱分化和生产愈伤织。但是在实践中，能否成功地诱导出愈伤组织还是研究者们面临的一个重要问题，有很多植物的愈伤组织的诱导还是不太成功。对有关植物细胞的生理、生长等研究工作来说，不能成功地诱导出该植物的愈伤组织就意味着实验的完全失败，后续植物细胞生理或代谢等的相关研究就根本无法开展。要使培养的细胞或组织最终发育成一个完整的植物体，一般要经过愈伤组织的细胞脱分化、人工诱导再分化两个不同的阶段，因此在这些实验中愈伤组织的诱导是否成功也是关键的基本因素。总之，愈伤组织诱导条件的选择在植物 细胞培养 技术中占据着非常重要的地位。
影响愈伤组织诱导的因素包括以下几个方面:目前一般认为能够影响愈伤组织诱导形成的主要因素。（1）不同植物和外植体诱导愈伤组织能力的差异。(2）培养基种类对愈伤组织诱导的影响。（3）外源激素对愈伤组织诱导的影响。（4）培养条件对愈伤组织诱导的影响:湿度条件、温度条件、光照条件。

6. 铁皮石斛组培苗要用种子吗

铁皮石斛组培苗有两种生产方式，其中一种要用种子。

铁皮石斛组培技术一种是直接采用铁皮石斛茎段培育，不同外植体对愈伤组织的诱导率有很大差异，以茎段诱导的愈伤组织出愈率最高，达到了83.3%。获得大量的铁皮石斛愈伤组织和幼苗。另一种则是使用铁皮石斛种子，种子萌发后形成原球茎，利用培养基对铁皮石斛诱导和增殖，得到大量铁皮石斛原球茎，然后培育出铁皮石斛幼苗。用种子生产的组培苗质量明显更高，有利于铁皮石斛组培苗的生产。

研究人员从野生铁皮石斛中分离获得内生真菌25 种，其中5 种真菌可促进铁皮石斛种子萌发，7 种真菌可与铁皮石斛幼苗形成共生关系，3 种真菌对幼苗生长有促进作用。因此分离和筛选促进铁皮石斛生长发育的适宜菌根真菌，是提高试管苗移栽成活率，解决生产的关键问题之一。

铁皮石斛组培苗和野生品多糖含量基本相同。对植物形态及茎、叶等组织构造的对比研究和总多糖含量比较表明，铁皮石斛组培品和野生品植物形态相似，组织结构基本相同，主要成分总多糖含量无显著性差异，二者药材品质相近。因此铁皮石斛试管苗经大田栽培后可替代野生药材，通过组织培养培育大量试管苗，发展铁皮石斛人工栽培是解决铁皮石斛资源紧缺问题的有效途径。

7. 如何诱导形成愈伤组织

形成愈伤组织后，将愈伤组织分开，放到放有生长素、细胞分裂素比例不同的培养基中继续培养，就分化出芽，再转移到另一个比例的生根培养基中会长出根，就可以移栽了

8. 植物组织培养选用什么材料（具体某植物的什么地方）最易形成愈伤组织，并请附上生长素的浓度

不同植物选取的部位当然不同，我只举个例子，比如杜鹃花组培，你可选取它的茎尖、叶片、茎段等一般都是植物的幼嫩部位（分裂旺盛的部位）更容易形成愈伤组织，诱导愈伤组织的生长素如果用萘乙酸的话浓度最好控制在0.05mg/L到0.1mg/L之间，吲哚乙酸可以高点，1.0mg/L左右就可以，细胞分裂素可以不加或者少加。

9. 比较愈伤组织诱导和继代培养中激素组合有什么不同

培养基不同：

每个植物都有其最适的初代培养基极易诱导愈伤培养基，有些植物的初代培养基和诱导培养是激素种类以及配比的不同，有些甚至是基本培养基都不一样。初代培养基主要是芽增殖率较高，诱导愈伤主要是诱导组织脱分化形成愈伤的过程。

形成

在植物的组织培养中，从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。启动期指细胞准备进行分裂的时期。外源植物生长素对诱导细胞开始分裂效果很好。常用的有萘乙酸、吲哚乙酸、细胞分裂素等。通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:1来诱导植物材料愈伤组织的形成。

10. 植物组织培养诱导愈伤组织的方法有哪些

看诱导材料是哪类的：
一般是用生长素和细胞分裂素按适宜的比例诱导。
生长素一般有IAA，NAA，2,4-D等，常用浓度有1.0-7.0mg/l不等，
细胞分裂素用KT，6-BA，玉米素等。一般是暗培养，25度，培养两周到一个月不等。