铁皮石斛无菌室中培育方法

『壹』 无菌室空气消毒常采用什么法

无菌室的消毒灭菌,可采取以下几种方法：
l．用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升,进行熏蒸.使用时,先密闭门窗,量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾,人员随之离开接种室,关紧房门,熏蒸20—30分钟即可.
2．0.1％升汞水消毒：用0.1％升汞水浸过的纱布或海绵进行指擦,或用喷雾器喷雾灭菌,使箱内的上下左右都沾上升汞水,手也可用升汞水消毒,并把袖子卷起来.喷雾后 20～30分钟,箱内的杂菌和雾滴一起落到箱底被杀死,内部的空气就变得很清洁.
3．紫外线照射灭菌：在无菌箱中装一支200伏、3O瓦的紫外线灯管；每次开20～30分钟,就能达到空间杀菌的 目的.照射结束后,罩黑布半小时,以增强杀菌效果.
4．石炭酸喷雾：在每次接种之前,用5％石炭酸溶液喷雾,可促使空气中的微粒和杂菌沉降,防止桌面微尘飞扬,并有杀菌作用.
5．石灰揩擦：经常用药物熏蒸,易造成酸性环境,特别用甲醛和高锰酸钾熏蒸长久,污染往往越来越严重,预防办法可把各种药品交替使用,过一段时间（约五周）用石灰擦洗一遍.实践证明,这样做效果很好.

『贰』 长期在无菌室中工作对身体有何影响

会大大降低人体对恶劣环境的抵抗和适应能力

『叁』 无菌室洁净度检测方法及标准是什么

无菌室是指将必定空间范围内之空气中的微粒子、有害空气、细菌等之污染物扫除，并将室内之温度、洁净度、室内压力、气流速度与气流分布、噪音振动及照明、静电控制在某一需求范围内，而所给予特别规划之房间

随着我国医药行业GMP制度的逐步施行,空气洁净技术被广泛地应用于制药企业、医院制剂室、手术室等医药卫生领域。因而,普及洁净度的常识,加强洁净度的检测作业,提高洁净室维护管理的知道,在当前实际作业中就显得尤为重要。现在,检测悬浮粒子所用的检测仪器基本上使用各种类型的尘埃粒子计数器,其性能指标均迥然不同,基本上能契合检测要求。对洁净室测验中一般依据洁净室的面积、洁净度的等级确认采样点数目、方位和采样量等多因素来决定的。那么，在洁净室测验中简单呈现哪些问题呢?

1、风速与换气次数：当洁净作业台净化过滤器规划定型后、房间体积呈固定状态，依据所测得的风速，就可以核算换气次数。有的企业只寻求风速大，导致换气次数太高，过滤器阻尼层被击穿，尘粒数超支。但如果风速太小，又会使得作业人员使得呼吸不适，对身体产生欠安影响。

2、压差：空气洁净等级不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净车间(区)与室外大气的静压差应大于10Pa，并应有指示压差的装置。有些单位把静压差调得太高（如40～50Pa），使作业人员感到身体不适。而关于有些产尘较大的房间，与相邻同等级的房间的静压差应为负值，才干有用控制尘粒数。维持室内正压是一个重要的阻隔手段。

3、 声级：我们发现，洁净作业台有些老厂房改造后，其他项目均契合有关规定，但关于声级的控制却时常把握欠好。噪音在静态下，约在60～70dB，动态下将超过70dB，长期处于这样的环境下会对人体产品影响，是不利于生产的。

房间里面洁净度怎么检测产品介绍

CW-HPC300三通道高精度手持式激光尘埃粒子计数器是深圳赛纳威依据国际标准ISO14644-1和GMP设计，有中英文版本可供选择，能同时对三个粒径档（用户可任意设定待测粒径）进行检测，并能通过USB接口高速下载，可广泛应用于电子工业和制药工业中的无尘车间环境检测、室内环境检测、过滤器效率分析测试、检查污染源分析、粒径分布分析等。

深圳赛纳威网站横幅图片

『肆』 石斛苗怎么种植方法

铁皮石斛苗培养成功以后还要进行一段时间的炼苗，也就是把在室内培养的铁皮石斛苗，慢慢移栽到自然环境中，完成从封闭环境到开放环境的自然过渡。在这个阶段中，需要培养出的铁皮石斛苗，慢慢移出室内，栽到大棚中等它的叶子变绿，根茎变得粗壮以后才能移栽到室外的自然环境中。

在室内培养的铁皮石斛苗，在向室外移栽时，还要经过洗苗。所谓洗苗是指把铁皮石斛苗从培养基中取出，并用清水冲洗，要把污染苗和优质苗分开存放，在冲洗以后，还要用消毒液对它的根进行彻底消毒，只有这样才能让它在移栽以后容易成活。如果冲洗不彻底，没有进行及时消毒，铁皮石斛苗在移栽以后就容易出现根部腐烂，它的成活率就会明显下降。

铁皮石斛苗从无菌室中移栽出来以后，还要经过一段时间的驯化，才能移栽到田间，在驯化铁皮石斛幼苗时，应该严格控制温度和湿度，等他训化成功以后，可以在种植的基质上挖好小坑，然后把铁皮石斛苗青青移栽到小坑中，并用基质盖好，然后浇足水分，这样铁皮石斛苗在五六天以后就能长出新根，以后只要管理得当它就能正常生长。

『伍』 石斛几月份种最好

在南方地区，铁皮石斛几乎可以全年种植，但是最好的种植季节在每年6月到10月份，这段时间石斛新芽萌发，可以将培育好的石斛苗或者高芽剪下种植在基质上。如果是购买成苗的话，全年都可以种植，注意避过冬天严寒的那几天即可。石斛盆栽种植的话，尽量种植生长了三年以上的石斛，这样的石斛成活率高，容易养护，全年可以种植。下面小编介绍两种铁皮石斛种植中常用的两种繁殖方法。

铁皮石斛组培苗图片

铁皮石斛组培苗的种植

到手的铁皮石斛组培苗的种植一般分为，炼苗，洗苗，驯化，种植四个阶段。组培苗的种植时间以初春和秋天为宜，严寒和暴晒都会影响组培苗的成活率。

1.炼苗：炼苗是铁皮石斛移栽种植前最重要的一项工作。移栽前要先进行一段时间的炼苗，把瓶苗放到合适位置慢慢适应自然环境变化，完成从封闭环境到开放环境的过渡。种植前要让铁皮石斛，慢慢适应大棚环境，待到叶绿较深、根茎粗壮、长出三四片新叶、无病害的情况下就可以种植了。

2.洗苗：洗苗是否科学、干净，直接决定种植后铁皮石斛的成活率。无菌室培养的铁皮石斛组培苗，在进行移栽前要进行必要的处理。其中清洗是关键。将培养基和苗从瓶中取出，把污染苗和优质苗分开放置，并用清水洗两三次，直至洗净培养基和琼脂。然后用准备好的消毒液对根部进行彻底的消毒。组培苗根系很脆，容易被碰伤，所以清洗和消毒时一定要轻，否则稍有不慎碰到伤口，植株很容易因感染无法成活。消毒后放置在通风的地方晾干水分。

3.驯化苗：驯化苗是把瓶苗从无菌室移植到自然环境炼苗而成活下来的大苗。易成活、易栽种，成分和功效不发生任何变化。驯化苗的驯化时间一般为3至4个月左右，在驯化苗驯化期间要严格控制温湿度。

4.栽种：栽种时在种植床基质上挖小坑，铁皮石斛苗轻拿轻放入小坑内，并用基质盖好。为了使铁皮石斛生长的更好，人工仿野生种植选择的基质，必须富含有机质，透气、疏水性要好用木屑、土等物质调配的混合基质更利于铁皮石斛根系的生长。

铁皮石斛扦插苗

石斛扦插繁殖法

在春季或夏季进行，以5~6月为好。健壮的植株选取其饱满圆润的茎段，每段保留3~5个节，横摆于碎树皮等基质中，2/3埋在基质中，保持基质湿润，待其茎上腋芽萌发，长出白色气生根，即可移栽。一般在选材时，多以中上部茎段为主，因其具有顶端优势，故成活率高，萌芽数多，生长发育快。

1.苗床制作选用疏松、透气、透水的新鲜竹锯末粉或木锯末粉作基质。基质中不能含有病虫、病苗、未腐熟的有机质，用10%—15%博医或用5%—10%高锰酸钾消毒处理竹锯末粉。将备好红砖铺成宽l米的厢面，长度根据地势和管理而定，将消毒处理锯面子装入厢内压紧，铺一层l—2厚腐质土，成为腐质土与锯面子双层苗床。

2.扦插母株应为品质优良，生长健壮，无病虫害，1—2年生枝条，向阳且节问粗短，芽尖饱满的枝条。石斛高芽也可以，用植株中部以上芽眼作扦条，不宜用开花的枝条或嫩枝。将采条放置阴凉通风处，15天后逐渐见光，然后使用。

3.剪取时，下切口应在节下或叶柄下0.2—0.5厘米处，向上要保留1—2个芽节平截，切口要平滑，伤口尽量要小，扦条带部分叶，插穗长3—5厘米阴天或清晨剪取的插条，枝条含水量充足，插后伤口易愈合，易生根，成活率较高。

4.将切取的扦条用10%高锰酸钾进行消毒处理，浸泡10—15分钟，取出后清水洗净，然后在15%生根剂溶液中浸蘸l—2秒或用吲哚丁酸溶液浸泡切口。生根剂或吲哚丁酸溶液不能浸到扦条腋芽，以免抑制发芽;使用浓度不要过高，以免抑制芽眼发芽。若用0.05%阿斯匹林溶液中浸泡插穗基部4—5小时，可促进生根，提高成活率。用5%食醋处理插条，也能加快伤口愈合，促进生根，提高成活率。

5.插条在厢面或盆里生长6个月后，待插条长到15—20厘米即可在春、秋季移栽分盆，春季在2—5月，秋季在根据小编了解，在南方地区，铁皮石斛几乎可以全年种植，但是最好的种植季节在每年6月到10月份，这段时间石斛新芽萌发，可以将培育好的石斛苗或者高芽剪下种植在基质上。如果是购买成苗的话，全年都可以种植，注意避过冬天严寒的那几天即可。石斛盆栽种植的话，尽量种植生长了三年以上的石斛，这样的石斛成活率高，容易养护，全年可以种植。

『陆』 无菌室灭菌消毒的基本方法有哪些

环境使用紫外 臭氧灭菌
表面使用酒精等消毒剂消毒
器皿使用高温灭菌或者高压灭菌
使用的培养基等使用高压或者过滤除菌

『柒』 无 菌 室 空 气 灭 菌 常 用 方 法 是

用紫外线消毒灯
以前去医院看病就碰到过一次，近中午休息时间，医生走时就开灯消毒。
约六月份的时候自己上淘宝买了一个近200块，自己用主要是用来给鞋袜消毒，为什么买。。呵呵～想下就知道了。

『捌』 植物的组织培养实验必须在专业的实验室中才能完成吗

组培实验成功必备的几大要素
一、实验环境
专 业的植物组培实验室是植物组织培养成功的关键因素之一。植物组织培养的整个过程都必须要在无菌的环境中进行，从外植体的消毒、修剪、接种到后期的无菌苗培 养，都离不开无菌的实验环境，一个专业而且洁净的植物组培实验室是植物组培实验成功不可缺少的条件，它可以很大程度的降低组培操作和无菌苗培养过程中的污 染几率。

二、实验仪器设备和耗材
1.超净工作台：是一种提供局部高洁净度工作环境通用性较强的空气净化设备，是植 物组织培养中的核心仪器，可以提供的洁净程度可达到百级。没有超净工作台提供的无菌环境，植物组培的成功率几乎为零。在常规的实验室环境内，是无法进行植 物组织培养操作的，即使完成实验操作，最后培养的无菌苗也会被外界的微生物污染。川布兰超净工作台具有防紫外线伤害装置，是国家的专利保护产品。此装置能 防止学生在操作不当忘记关闭紫外灯进行实验的情况下，免受紫外灯照射造成伤害，是植物组织培养成功的必备“武器”。

2.高压蒸汽灭菌锅：是植物组织培养实验的另一核心仪器，在植物组织培养的过程中进行培养基、接种仪器的灭菌，使其达到无菌的目的。在2012北京川布兰组培大赛中，由于部分学校没有购买高压蒸汽灭菌锅，而是使用普通家用高压锅对培养基进行灭菌，（家用高压锅的灭菌温度未能达到完全杀死细菌的温度），最后实验结果表明，其污染的概率达到了70%以上，致使没能完成本次组培大赛；而大部分使用高压灭菌锅灭菌培养基并结合超净工作台使用的学校，能有效的把污染几率控制在10%以下，有的学校甚至达到零污染，总而言之，超净工作台和高压灭菌锅是植物组织培养成败的决定性仪器，而选择专业的组培必备仪器更有利于实验的开展和成功。

3.微量可调移液器及吸头：量 取微量液体的实验工具，用于量取少量和微量的激素母液，调节各种培养基中所需要的激素浓度。微量可调移液器在其他实验中的应用率同样较高，而有些实验要求 所用仪器保证无菌，即可以进行高温高压灭菌和紫外线的照射，传统的移液器是无法完成的，而由川布兰的微量可调移液器在设计开发时充分考虑到了这点。

4.光照培养架：无菌苗培养的场所，提供植物生长所需的光照，并能根据实际情况控制光照强度。如果直接将接种好的组培瓶放置于一般环境中，则会由于光照强度不足导致诱导失败。因此，最好选择光照培养架为组培苗提供更适宜生长的条件。

5.光照培养箱：无 菌苗培养的场所，在植物培养过程中不但可以提供合适的光照强度，还能控制无菌苗培养的温度。另外光照培养箱还能根据不同植物的生长习性，调节光照周期，适 合用于开展课外探究活动，例如，短日照菊花品种通过调节光照时间长短可以控制菊花开花或饲养昆虫、小动物等。光照培养箱比光照培养架功能更加强大，应用面 不仅仅局限于植物组织培养的范围内，且管理也更加方便，即使在寒暑期无人值守的情况下，只要事先将各个参数设定好，既无后顾之忧。

『玖』 铁皮石斛组培种子怎么进行无菌处理

对未开裂蒴果的种子处理很简单，以下方法任何一种都有效：
1.在洁净工作台上将新鲜蒴果用75%酒精30-60秒，取出放在无菌的不锈钢碟是让蒴果上的酒精自然风干后，用无菌手术刀将蒴果切开，把种子接种到培养基中进行培养。该方法的成功率可达80%以上。
2.新鲜升汞在0.1%的升汞溶液中浸泡6-10分钟，沥干溶液，无菌水冲洗5次后按“1”的方法接种培养。成功率在90%以上。此方法最繁琐。
3.将新鲜蒴果浸泡·在1000mg/l的二氧化氯溶液中20-30分钟，沥干溶液后，按“1”的方法接种培养。成功率在95%以上。此方法最简便快捷。
还有其他方法，你可以尝试去做，但建议你不要把程序搞得复杂化